mason/secretom/training.mas

   1 <span style="white-space:nowrap; display:block; padding:3px; background-color: #fff; text-align:center; color: #444; font-size:1.3em">
   2 Mass Spectrometry-based Proteomics Workshop
   3 </span>
   4
   5 <center><p><strong>April 3rd &amp; 4th, 2012</strong></p></center>
   6
   7 <center><p><em>Supported by NSF Plant Genome Program<br />
   8 Instruction: Drs. Jocelyn Rose and Ted Thannhauser and Sheng Zhang<br />
   9 Location: Cornell Proteomics &amp; Mass Spectrometry Core Facility</em></p></center>
  10
  11 <p>We had another extremely successful Proteomics Workshop this year that was highly oversubscribed. The workshop comprised both lectures and practical lab-based training in proteomic analysis, using advanced mass spectrometry techniques and bioinformatics and was targeted towards undergraduate and graduate students.  Based on the positive and enthusiastic feedback, a similar course will be offered next year.</p>
  12
  13 <p><a href="/documents/secretom/MSOct09WorkshopHandouts.pdf">Handouts from the workshop</a> [pdf]</p>
  14 <p><a href="#schedule">Schedule</a></p>
  15 <p><a href="#photos">Photos from this year's workshop</a></p>
  16
  17 <center><img src="/documents/img/secretom/spectrometer1.png" /><img src="/documents/img/secretom/spectrometer2.png" /></center>
  18
  19 <br /><br /><br />
  20
  21 <p><center><strong><a name="schedule">SCHEDULE</a></strong></center></p>
  22
  23 <p><strong>April 3rd:</strong></p>
  24 <p><strong>8:00am - 8:30am: Registration (badge, program handouts, breakfast</strong>) in room 130</p>
  25 <p><strong>8:30am - 8:35am </strong>in room 130:</p>
  26 <ol type="1">
  27 <li><strong>Program introduction</strong> by Professor Joss Rose</li>
  28 </ol>
  29 <p><strong>8:35am - 10:00am</strong> in room 141:</p>
  30 <ol type="1" start="2">
  31 <li><strong>Experimental 1:</strong> Protein denaturing, reduction and alkylation of crude cell extract samples for shotgun proteomics analysis. (Attendees divided into 4 groups)</li>
  32 </ol>
  33 <ul>Instructors: Huiming Yan (bench 1), Yong Yang (bench 2), Bob Sherwood (bench 3) and Celeste Ptak (bench 4).</ul>
  34 <p><strong>10:20am - 11:20am</strong> in room 130 </p>
  35 <ol type="1" start="3">
  36 <li><strong>Lecture 1 Presentation: </strong> Sample preparation and separation prior to MS analysis by Dr. Ted Thannhauser</li>
  37 </ol>
  38 <p><strong>11:30am - 12:00pm</strong> in room 141:</p>
  39 <ol type="1" start="4">
  40 <li><strong>Experimental 2: </strong> in solution trypsin digestion.</li>
  41 </ol>
  42 <p><strong>12:00pm - 1:00pm </strong> in room 130<strong>: </strong>Lunch and Break</p>
  43 <p><strong>1:00pm - 2:15pm</strong> in room 130:</p>
  44 <ol type="1" start="5">
  45 <li><strong>Lecture 2 Presentation: </strong> MS instrument fundamentals and Applications: (proteomics case studies) by Dr. Sheng Zhang</li>
  46 </ol>
  47 <p><strong>2:30pm - 3:30pm</strong> in room 143:</p>
  48 <ol type="1" start="6">
  49 <li><strong>Experimental 3: </strong> Lab tour and demo, split into 3 groups (20 min/rotation)</li>
  50 </ol>
  51 <ul>
  52 <ul type="DISC">
  53 <li>nanoLC-MS/MS for iTRAQ samples in 4000 Q Trap: by Dr. Celeste Ptak</li>
  54 <li>MALDI-TOF/TOF analysis for 2D gel-based protein IDs: by Bob Sherwood</li>
  55 <li>NanoLC-MS/MS analysis for 1D gel bands: by Kevin Howe</li>
  56 </ul>
  57 </ul>
  58 <p><strong>4:00pm - 5:00pm: </strong></p>
  59 <ol type="1" start="7">
  60 <li><strong> Experimental 4:</strong> set up nanoLC-MS/MS overnight running for in-solution digested samples with 60-min gradient for each run.</li>
  61 <ol type="a">
  62 <li>10 samples on 4000 Q Trap by Dr. Celeste Ptak</li>
  63 <li>10 samples on Synapt HDMS by Kevin Howe and Yong Yang</li>
  64 </ol>
  65 </ol>
  66 <p><strong>April 4th:</strong></p>
  67 <p><strong>8:00am - 8:30am: </strong> breakfast and laptop computer setup in room 130</p>
  68 <p><strong>8:30am - 9:00am:</strong></p>
  69 <ol type="1" start="8">
  70 <li><strong>Experimental 5:</strong> Database searching and file conversion for overnight LC-MS/MS files</li>
  71 </ol>
  72 <ul>
  73 <ol type="a">
  74 <li>Mascot Maemon search and wiff file conversion to TMP file by Dr. Celeste Ptak in room 130</li>
  75 </ol>
  76 <ol type="a" start="2">
  77 <li>PLGS 2.4-Mascot database search and generating PKL file by Yong Yang and Kevin Howe in room 143</li>
  78 </ol>
  79 </ul>
  80 <p><strong>9:30am - 10:30am: </strong></p>
  81 <ol type="1" start="9">
  82 <li><strong>Lecture 3 Presentation:</strong> Introduction to Mascot-based MS database search and data interpretation by Professor Joss Rose</li>
  83 </ol>
  84 <p><strong>10:30am - 10:45am:</strong> transfer PKL files and TMP files into individual laptop computers.</p>
  85 <p><strong>10:45am - 11:15am: </strong>in room 130 and room 143</p>
  86 <ol type="1" start="10">
  87 <li><strong>Experimental 6: </strong> Practice for generating PKL files and TMP files. Instructors: Celeste Ptak for TMP files, Huiming Yan and Kevin Howe for PKL files.</li>
  88 </ol>
  89 <p><strong>12:00pm - 1:00pm </strong> in room 130<strong>: </strong>Lunch and Break</p>
  90 <p><strong> 1:00pm - 3:00pm </strong>in room 130</p>
  91 <ol type="1" start="11">
  92 <li><strong>Experimental 7: </strong> database search practice against either Mascot public search engine or in-house licensed search engine. Assistants: Celeste Ptak, Huiming Yan, Kevin Howe and Yong Yang.</li>
  93 </ol>
  94 <p><strong>3:20pm - 4:00pm: </strong>in room 130</p>
  95 <ol type="1" start="12">
  96 <li>Summary of the group results for shotgun analysis in 4000 Q Trap and Synapt HDMS. Summary of the iTRAQ demo results for quantitative proteomics by Sheng Zhang.</li>
  97 </ol>
  98 <p><strong>4:00pm - 5:00pm:</strong> in room 130</p>
  99 <ol type="1" start="13">
 100 <li>Wrap-up comments, questions and suggestions</li>
 101 </ol>
 102
 103 <br /><br /><br />
 104
 105
 106 <center><img src="/documents/img/secretom/mass_spec_workshop_2012.jpg" /></center>
 107 <center><p>Participants in the 2012 workshop</p></center>
 108 <p><a name="photos">Here are some pictures from previous workshops.</a> Thank you all for a great time!!!</p>
 109
 110 <center>Participants</center><br />
 111 <center><img src="/documents/img/secretom/workshop1.png" /></center>
 112 <center><p>The Class of 2009... our brave band</p></center>
 113 <center><img src="/documents/img/secretom/workshop2.png" /></center>
 114 <center><p>Bob explaining the mysteries of the MALDI TOF-TOF</p></center>
 115 <center><img src="/documents/img/secretom/workshop3.png" /></center>
 116 <center><p>Celeste and the art of protein fractionation</p></center>
 117 <center><img src="/documents/img/secretom/workshop4.png" /></center>
 118 <center><p>Kevin revealing some of the principles and wizardry of mass spectrometry</p></center>
 119 <center><img src="/documents/img/secretom/workshop5.png" /></center>
 120 <center><p>Rapt attention as Bob demonstrates 2D gel analysis software</p></center>